Tatsuya Nagata

Formação

• Doutorado - Periodo: 1995 a 1997 - Virology
  Wageningen University
• Mestrado - Periodo: 1989 a 1991 - Virology
  Hokkaido University
• Graduação - Periodo: 1985 a 1988 - Virology
  Hokkaido University

Atuação Profissional

• Archives of Virology- / Periodo: 2007 a atual
• Bioscience Journal (UFU. Impresso)- / Periodo: 2011 a atual
• Fitopatologia Brasileira- / Periodo: 2004 a atual
• Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal- / Periodo: 2014 a atual
• Journal of General Plant Pathology- / Periodo: 2009 a atual
• Journal of General Plant Pathology- / Periodo: 2008 a atual
• Plant Pathology Journal- / Periodo: 2005 a atual
• Scientia Agrícola (USP. Impresso)- / Periodo: 2009 a atual
• Tropical Plant Pathology (Impresso)- / Periodo: 2010 a atual
• Universidade Católica de Brasília-UCB / Periodo: 2001 a 2008
• Universidade de Brasília-UNB / Periodo: 2008 a atual
• Virus Genes- / Periodo: 2007 a atual
• Virus Research (Print)- / Periodo: 2011 a atual

Linha de Pesquisa

• Biotecnologa
• Virologia Celular e Molecular

Projetos de Pesquisa

• Análise metagenômica do viroma em água de esgoto
  O objetivo deste projeto é estudar a comunidade de vírus (Viroma) em águas residuais recolhidas na Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) no DF, Goiás e Mato Grosso utilizando a técnica de ?Next Generation Sequencing? ou NGS. A água de esgoto influente envolve água ambiental, que contém muitos microorganismos além de patógenos humanos. Parte desta comunidade de microorganismo envolve vírus como, vírus humanos, animais, vírus de insetos, de plantas e, o mais importante, os bacteriófagos, que influenciam o desempenho de biorreatores da ETE. Os biorreatores da ETE baseiam-se principalmente em bactérias que degradam o teor biológico da água de esgoto, que são derivados de resíduos humanos, resíduos de alimentos, sabões e detergentes. A eficiência dos biorreatores oscila devido a muitos fatores, entre eles as infecções pelos bacteriófagos são responsáveis por reduzir a eficiência do tratamento. O conhecimento da comunidade bacteriófago (principalmente fagos de Siphoviridae, Myoviridae e Podoviridae) em água de esgoto é muito importante para enfrentar este problema. Águas residuais ou água de esgoto contém vírus humanos patogênicos, que podem ser repassados a outras fontes de água pela água efluente. A principal fonte contaminação é fezes humanas. Os vírus mais comumente encontrados são o vírus da hepatite A, hepatite E, rotavírus, norovírus, sapovírus, enterovírus e poliovírus. Em sua maior parte há monitorização destes, no entanto, não existem estudos acerca da diversidade genômica desses patógenos encontrados em águas de esgoto. Neste estudo, a visão total de vírus que infectam humanos em águas residuais ao longo do ano (total de 2 anos) será investigada. De acordo com o resultado acima, o procedimento de diagnóstico para os vírus humanos relevantes serão estabelecidos utilizando Transcrição Reversa e Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa (RT-qPCR). A etapa de Transcrição Reversa é imprescindível uma vez que os vírus supracitados são vírus de RNA. Caso sejam detectados vírus de DNA essa etapa não se fará necessária. Caso haja ocorrência de novos vírus, estes serão sequenciados por meio da técnica de NGS. Os resultados obtidos revelarão características que poderão ser associadas à importância dos mesmos indicando uma possível monitorização futura. Este projeto será o primeiro passo para entender viroma em águas residuais no Brasil. Muitas informações novas serão obtidas pelos pesquisadores na região Centro-Oeste, o que tornará nossa experiência científica muito maior.
  Período: 2013 - atual / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Estudo da termo-sensibilidade de gene de resistência a vírus vegetal e desenvolvimento de plantas resistentes termo-estáveis como estratégia para preparação para mudanças climáticas
  Os genes de resistência a patógenos encontrados em plantas estão sendo amplamente utilizados nos programas de melhoramento genético vegetal para o desenvolvimento de plantas resistentes com características agronômicas e nutricionais superiores. Entretanto, muitos destes genes de resistência são termo-sensíveis, resultando em quebra de resistência em situações de alta temperatura do ambiente de cultivo. O aquecimento global é um fato e a elevação da temperatura mínima, máxima e média deverá ser inevitável. Dessa forma, o estudo dos efeitos do aumento da temperatura é urgente, particularmente para a agricultura, fonte de alimentos para a humanidade. Dentro deste contexto, a caracterização destes genes termo-sensíveis em relação às mudanças de temperatura e o desenvolvimento de genes mutantes que tornam as plantas resistentes mesmo a altas temperaturas são temas estratégicos para se viabilizar a produção de alimentos em quantidade e qualidade suficientes no futuro. Este projeto visa avançar no conhecimento sobre a atuação de genes de resistência em condições de temperatura elevada com o propósito de desenvolver futuramente plantas resistentes a patógenos mesmo em altas temperaturas, utilizando como modelo o gene de resistência L3 presente em plantas do gênero Capsicum que confere resistência à infecção do patógeno Pepper mild mottle virus (PMMoV; gênero Tobamovirus). A pimenteira constantemente sofre ataque por fitopatógenos, sendo que os vírus são dos mais importantes. O dano econômico causado por PMMoV em espécies de Capsicum tem-se tornado cada vez mais importante, devido à sua facilidade de transmissão por contato e por instrumentos agrícolas contaminados e ao aumento do cultivo de pimenteiras (pimentões e pimentas) em condições protegidas. Em Capsicum spp. são conhecidos os genes de resistência L1 a L4 que conferem resistência a tobamovírus e que são utilizados no melhoramento genético. Sabe-se que a elicitação dos genes L de Capsicum ocorre pela capa proteica dos tobamovírus. Nas reações de resistência a genes L observa-se a ocorrência de resposta de hipersensibilidade, induzido pela sinalização de morte celular programada desencadeada por disfunções das mitocôndrias. Essa rota, porém, ainda não foi elucidada para gene L. Os genes de resistência L de Capsicum spp. apresentam sensibilidade à elevação de temperatura, sendo esse fato de extrema importância, pois o impacto dessa doença na cultura pode ser agravado considerando-se as previsões futuras de aquecimento global. O presente projeto tem como objetivos: 1) estabelecer o modelo de estudo do gene de resistência L3 de Capsicum chinense, através da expressão transiente desse gene por agro-inoculação em N. benthamiana em co-inoculação com um clone infeccioso de PMMoV. Esse sistema induz reação de hipersensibilidade por morte celular programada formando lesões necróticas nas folhas tratadas; 2) caracterizar a termo-estabilidade, pela resposta de hipersensibilidade induzida pelo gene L3, frente à infecção de PMMoV em diferentes temperaturas; 3) desenvolver mutantes do gene L3 utilizando a técnica de Error-prone PCR (mutações pontuais ao longo do gene) e de mutação dirigida, e selecionar os mutantes funcionais em temperatura elevada, utilizando o sistema desenvolvido na atividade (2); e 4) produzir plantas transgênicas de N. benthamiana com o gene mutante L3 (termo-estável) com a técnica de agro-infecção. Espera-se que esse projeto contribuirá com o desenvolvimento de plantas resistentes em condições de alta temperatura, em preparação para a mudança climática global. Os principais produtos desse projeto são o conhecimento sobre a interação do gene de resistência-patógeno em diferentes condições de temperatura, os gene mutantes L3 termo-estáveis para serem usados em programas de desenvolvimento de plantas resistentes e plantas transgênicas como modelo do funcionamento dos genes m
  Período: 2013 - atual / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Development of platforms for the expression of pharmaceutical proteins using plant virus vectors
  The main objective of this project is to develop new technologies to produce therapeutic and active proteins in biofactory plants. Specific goals include: (1) Development of vectors based on three different plant viruses to express recombinant proteins in plants. (2) Development of pilot experiments aimed at expressing specific enzymes or antigens using these vectors. (3) Development of a pilot plant for the production of specific enzymes or antigens on an industrial scale. Plants are a very interesting alternative to microbial and mammalian cell culture systems for protein expression. They can produce efficiently and sustainably large volumes of products with significantly decreased manufacturing costs and biological risks. Plants are particularly attractive as bioreactors because they do not carry or propagate human diseases and plant-expressed proteins are generally efficiently assembled with appropriate post-translational modifications. Two main approaches are commonly used to express recombinant proteins in plants, stable transformation (transgenic plants) and viral transient expression, the latter being the system of choice for this project. In Brazil, the new project on subunit vaccine production against Yellow fever virus using plants is starting at Institute of Bio-manguinhos/Fundação Oswaldo Cruz (The National Institute of Public Health of Brazil) using technologies owned by a private company (Frauhofer, USA; personal communication). In the world, several venture companies are initiating their activities using plants to produce therapeutic proteins in large scale. However, the techniques are still in development to achieve more cost-effective processes for high quality protein production. Plant virus vectors are being developed for protein expression in plants as an alternative to other expression methods, since this technology has several advantages over the current expression systems, including: (1) The speed of protein expression - after two-three weeks the proteins can be extracted; (2) The modification of a viral vector to introduce a new gene is simple and fast (over a month) and, thus, the system is ideal for obtaining customized proteins in short periods of time; (3) The same vector can be used for expressing very diverse proteins; (4) The products obtained are free from human pathogens or other potential risks, which is particularly important in the case of pharmaceuticals; (5) No transgenic plants are used; and (6) The technology has very little ecological risk if a virus is used as vector in a region where the virus is already endemic
  Período: 2013 - atual / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Produção de plantas transgênicas imunes à infecção viral com uma nova estratégia baseada no impedimento da replicação do vírus
  O projeto tem como objetivo desenvolver uma nova estratégia de controle de vírus em plantas a partir do estudo da replicação de vírus. A estratégia tem como fundamento a geração de plantas de Nicotiana benthamiana totalmente imunes contra a infecção a dois vírus, Tomato blistering mosaic virus (ToBMV, Tymovirus) e Pepper ringspot virus (PepRSV, Tobravirus), pela técnica de transgenia com nocaute de genes da planta diretamente ligadas e essenciais para a replicação viral. Plantas de N. benthamiana são altamente susceptíveis à infecção por esses dois vírus. Os vírus de RNA de fita simples e senso positivo normalmente se replicam na superfície da membrana de organelas, por exemplo no retículo endoplasmático, mitocôndria, cloroplasto, peroxisomo e outros, dependendo do vírus. Para que a replicação ocorra, há a formação de um complexo replicativo contendo o RNA viral e as proteínas virais relacionadas à replicação como metiltransferase, helicase e polimearase de RNA dependente de RNA (RdRp), que se liga a essas membranas via proteína de membrana do hospedeiro. A ligação entre proteínas virais chaves na replicação e proteínas de membrana do hospedeiro é um pré-requisito para a replicação na célula. Esta interação entre vírus e hospedeiro é primordial para que haja qualquer resposta de susceptibilidade ou resistência, sendo um processo anterior às respostas de defesa da planta como PTGS (silenciamento gênico pós-traduçional) e morte celular programada. Ao se inviabilizar a replicação do vírus, com o nocaute de proteínas do hospedeiro que são essenciais para a replicação viral, a infecção não terá êxito em nível monocelular, resultando na ausência completa de replicação e, consequentemente, de infecção local e sistêmica. Esta estratégia é pouco explorada pelos virologistas e acreditamos que essa seja uma excelente oportunidade para a produção de resultados inéditos e de grande impacto para a ciência. Os estudos serão realizados com um isolado de ToBMV e PepRSV por eles serem relatados exclusivamente no Brasil e por apresentarem vírions com associação a cloroplastos e mitocôndrias, respectivamente. Neste projeto, inicialmente o local de replicação de ToBMV e PepRSV será determinado, utilizando o sistema de expressão in vivo de proteínas virais e observação em microscópio confocal a laser. Uma vez confirmada a associação de organelas como cloroplastos e mitocôndrias, ou outras, essas organelas serão purificadas e as proteínas que apresentam afinidade às proteínas virais do complexo de replicação serão identificadas por 2D PAGE e caracterizadas com o sequenciamento de proteínas. A estratégia de supressão de expressão por VIGS será então usada para avaliar até cinco proteínas candidatas do hospedeiro em relação à capacidade de impedir a replicação viral de forma transiente, para cada vírus. Com a confirmação do envolvimento de pelo menos uma das proteínas, plantas de N. benthamiana transgênicas com nocaute do gene correspondente para cada vírus serão produzidas. Espera-se que essas plantas sejam imunes à infecção viral, tanto para ToBMV como para PepRSV, separadamente. A equipe vem trabalhando de forma contínua nesse tema e ferramentas necessárias foram adquiridas ou produzidas com antecedência, como genoma viral clonado e anti-soros específicos adquiridos. O projeto é ambicioso e o período de tempo de três anos é curto em vista do grande número de atividades propostas, sendo necessário um aporte de recursos alto (cento e vinte mil reais) para viabilizar a sua execução. Este é um trabalho inédito no Brasil e contribuirá para consolidar uma estrutura e parceria para o estudo básico de replicação viral vegetal no Brasil.
  Período: 2013 - atual / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• ESTUDO DO MECANISMO DE REPLICAÇÃO DE TYMOVÍRUS, COM ENFOQUE NO PROCESSO DE MODIFICAÇÃO DE CLOROPLASTOS
  Os vírus que pertencem ao gênero Tymovirus geralmente produzem uma grande quantidade de partículas virais nas células hospedeiras vegetais. Em células infectadas com tymovírus, os cloroplastos apresentam-se deformados com a formação de compartimentos nas membranas externa e interna da organela. Os tymovírus usam estes compartimentos para a replicação do seu genoma, resultando na produção de uma grande quantidade de partículas virais. Entretanto, poucos estudos são realizados com este tema. O projeto propõe estudar o processo de modificação (deformação) dos cloroplastos induzidos pela infecção do tymovírus Tomato blistering mosaic virus (ToBMV), um vírus recentemente reconhecido como uma nova espécie do gênero Tymovirus e encontrado até o momento somente no Brasil. A espécie-tipo do gênero, Turnip yellow mosaic virus (TYMV), causa também este tipo de modificação de cloroplastos, que resulta na formação de uma estrutura tipo viroplasma. Acredita-se que este compartimento no cloroplasto, mais especificamente uma estrutura esférica formada pela membrana externa e interna do cloroplasto, seja o local de replicação viral permitindo uma elevada eficiência do seu processo de replicação. Este aumento na eficiência pode estar relacionado a algum mecanismo de escape das atividades de defesa celular como RNAi, via da ubiquitina-proteassoma e outros sistemas da planta preparados contra a invasão de vírus. Até o momento, o estudo de interação entre proteínas de tymovírus e cloroplastos foi feito somente utilizando o TYMV. O projeto tem como objetivo estudar a interação das três proteínas-chave do ToBMV (115K-Metiltransferase-Proteinase, 66K-Polimerase de RNA viral e Capa protéica) com o cloroplasto pela expressão destas três proteínas utilizando os genes clonados em vetor plasmidial de expressão e inoculação em protoplasto. A ocorrência de co-localização de cada proteína no cloroplasto será avaliada por microscópio confocal a laser utilizando imunomarcação e expressão destas prot
  Período: 2012 - 2014 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Planta como Biorreator: uso de planta para expressar o antígeno multiepitopo do Dengue virus para kit diagnóstico
  O projeto proposto apresenta a grande inovação de usar PLANTAS como BIORREATORES de proteínas úteis na área de saúde humana. O projeto objetiva o desenvolvimento de três sistemas de expressão de proteínas recombinantes em planta, e o seu uso na produção de polipeptídeos multiepitópicos do Dengue virus (DENV), como a primeira aplicação desses sistemas. A proteína expressada poderá ser utilizada diretamente para a montagem de um kit diagnóstico da doença da Dengue, que se encontra em falta no Brasil, e atualmente se importa grande quantidade desses kits para suprir a demanda do País. O projeto surgiu devido a esta demanda urgente em produzir um kit diagnóstico da doença Dengue, a baixo custo e realizável em grande escala, e conta com três instituições de execução (Universidade de Brasília, Embrapa e UniCEUB), junto com o Laboratório Central de saúde publica do DF (LACEN-DF) e o setor de Flavivírus do Instituto Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), que trabalharão em uma rede multidisciplinar. O presente estudo objetiva a construção e expressão de duas proteínas recombinantes multiepitopo apartir da proteína estrutural de envelope E, que abranjem os quatro sorotipos relatados do Dengue virus. A expressão será realizada em plantas por meio de três estratégias distintas: (i) produção de alface transplastômica (via transformação em DNA de cloroplasto pelo método de biobalística); (ii) uso de vetor viral vegetal de Cucumber mosaic virus (CMV); e (iii) Agrobacterium tumefaciens transient expression (ATTE) pela infiltração das construções de expressão via Agrobacterium tumefaciens junto com supressores de PTGS (Post-transcriptional gene silencing). Como existe uma diferença nos códons de acordo com o hospedeiro/organela, a eficiência e a aplicabilidade destes sistemas serão avaliadas com a comparação de duas construções codificando um mesmo polipeptídeo, mas com códons distintos, específicos para o hospedeiro a ser expressado. A produção em massa de antígeno do DENV para viabilizar
  Período: 2008 - 2011 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: DESENVOLVIMENTO
• Estudo da interação entre proteínas virais de Pepper ringspot virus e mitocôndrias e construção de clones de cDNA infecciosos
  Pepper ringspot virus (PepRSV) foi originalmente isolado no Brasil de plantas de Capsicum spp., que apresentavam sintomas de manchas anelares. Este foi considerado como uma estirpe de Tobacco rattle virus (TRV, Tobravirus). Entretanto a análise da sua seqüência genômica revelou que seria um vírus distinto do TRV, sendo a sua ocorrência somente relatada no Brasil. As partículas são alongadas e rígidas e o seu genoma possui dois segmentos de RNA fita simples e senso positivo. Uma particularidade que o distingue de outros vírus conhecidos é a associação de suas partículas em alta densidade com as mitocôndrias do hospedeiro. Estudos fisico-químicos preliminares da proteína viral p29 do PepRSV sugeriram ser esta a proteína candidata que apresente alguma interação com as mitocôndrias. A capa protéica (CP) é a segunda candidata a apresentar interação com as mitocôndrias, já que está presente na superfície das partículas virais. Com estas premissas o projeto propõe o estudo de interação das proteínas virais p29 e CP com as mitocôndrias, utilizando a estratégia de fusão da proteína-alvo com proteínas fluorescentes. A localização da p29 e CP fusionadas com CFP (ou YFP) será observada com o microscópio confocal a laser. A elucidação da relação entre p29 e CP do PepRSV e mitocôndria poderá oferecer uma poderosa ferramenta para estudar a interação vírus-hospedeiro, na elucidação do processo básico de infecção e mais especificamente no envolvimento de outros genes virais com a mitocôndria ou com a cascata de sinalização de MAPK. O projeto apresenta também o objetivo de produzir clones infecciosos do PepRSV. Vetores virais com genomas completos de TRV estão sendo usados para inúmeros estudos gênicos e de interação planta-patógeno. Entretanto no Brasil, o TRV ainda não foi relatado, restringindo o seu manuseio neste País. Sendo o PepRSV um vírus brasileiro e apresentando características adequadas ao desenvolvimento de um vetor viral (mesmo gênero do TRV, Tobravirus), este projeto t
  Período: 2009 - 2011 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Desenvolvimento de uma nova metodologia de avaliação de contaminação fecal em água por PCR tempo-real e levantamento da qualidade sanitária da água de fontes, reservatórios de água e água tratada no DF
  Contaminações fecais humanas na água causam sérios problemas à saúde pública, por exemplo causando doenças como hepatites e diarréia, sendo a incidência desse tipo de problema bastante alta no Distrito Federal, principalmente nas cidades satélites de Brasília. Os métodos de monitoramento da qualidade da água, entretanto, não são suficientemente sensíveis, são de realização demorada devido à necessidade de cultivo de bactérias, e limitada por não viabilizar a avaliação de contaminação viral. O desenvolvimento de um método confiável, baseado em técnicas moleculares e de rápida execução constitui-se em uma demanda urgente para a disponibilização de água segura à população do Distrito Federal e também de todo o Brasil. Muitos indicadores microbianos foram testados para avaliar a contaminação fecal da água, por exemplo a contagem (cultura) de coliformes fecais e enterococci. Entretanto, existe uma correlação muito baixa entre o indicador de bactérias e a presença de vírus causadores de gastroenterites (Brownell et al., 2007; Savichtcheva et al., 2006; Wetz et al., 2004). Com o intuito de preencher essa lacuna, este projeto visa desenvolver um novo sistema de monitoramento da qualidade sanitária da água com a avaliação de três indicadores virais, sendo dois que causam grastroenterites e o terceiro constituído de um indicador com uma concepção completamente nova. Os primeiros dois indicadores de contaminação fecal são os Bocavírus e os Norovírus. Estes dois vírus são candidatos potenciais devido às infecções freqüentes por esses vírus na população do Distrito Federal (dados não publicados pela nossa equipe). O terceiro candidato é um vírus vegetal, o vírus do mosqueado suave da pimenteira, Pepper mild mottle virus (PMMoV). Este vírus infecta plantas de pimenta e pimentão, sendo que muitos alimentos processados contêm este vírus. Este vírus foi detectado abundantemente nos estudos metagenômicos de fezes humanas nos Estados Unidos (Zhang et al., 2006) e
  Período: 2008 - 2011 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Efeito da eficiência de expressão e interação de supressores de silenciamento gênico pós-transcricional dos vírus vegetais em Nicotiana benthamiana.
  Este projeto visa aprofundar os estudos de supressores de silenciamento gênico pós-transcricional (PTGS) de três vírus brasileiros. A nossa equipe vem se dedicando à caracterização da patogenicidade de três vírus: Brugmansia suaveolens mottle viurs (BsMoV, Potyvirus), Pepper mild mottle virus (PMMoV, Tobamovirus) e Tomato severe rugouse virus (ToSRV, Begomovirus). A sequência do genoma completo destes vírus foi determinada e clones infecciosos estão sendo construídos. BsMoV é um vírus somente relatado no Brasil que apresenta a particularidade de apresentar alta severidade em diversas solanáceas, a ponto de levá-las à morte em um curto espaço de tempo. Já PMMoV é um tobamovírus com alta especificidade a pimentas e produção de enorme quantidade de partículas no tecido infectado. Já ToSRV é o principal begomovírus que ocorre em tomateiro no Brasil, dentre mais de 17 espécies já relatadas, indicando uma alta adaptação às condições de cultivo no Brasil. Todos esses vírus são infectivos em Nicotiana benthamiana. Já temos clonado os genes conhecidos como supressores de silenciamento gênico: HC-Pro do BsMoV, proteína 126K do PMMoV e AC2 de ToSRV. Acredita-se que os mecanismos responsáveis pela supressão do silenciamento de cada vírus é distinto e temos em mãos a oportunidade de estudar a fundo os mecanismos envolvidos e a sua interação sinergística entre eles. Adicionalmente, verificamos que a supressão do silenciamento gênico causado pela proteína 126K de PMMoV parece sistêmica, translocando-se em lugares distintos dos pontos agroinfiltrados. Assim sendo, este projeto tem como objetivo avaliar a atividade de supressão de silenciamento pós-transcricional de cada vírus, compará-los, estudar a sua interação sinergística e o mecanismo de atividade de cada supressor, particularmente a da proteína 126K. Os genes já se encontram clonados em vetor de agroinfiltração e os testes preliminares de avaliação da supressão de PTGS já foram realizados e a ação confirmada. Neste projeto, a
  Período: 2008 - 2011 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Mecanismos de Resistência a Infecção por Tospovírus e Geminivirus em Hortaliças
  O convênio bilateral entre Brasil e Holanda na área de agricultura, fitovirologia e biologia molecular
  Período: 2008 - 2011 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• A caracterização e a construção de cDNA infeccioso de Pepper mild mottle virus para o estudo de interação vírus-gene de resistência em Capsicum spp.
  O gênero Capsicum possui varias espécies importantes para a agricultura no Brasil. O DF é hoje reconhecido como um pólo produtor de pimentões e junto com o entorno também de pimentas. Existe uma demanda urgente em determinar os principais problemas que resultam na baixa produtividade destas culturas nesta região. O pimenteira constantemente sofre infecção por fitopatógenos, sendo que um dos mais importantes é o vírus. O dano econômico causado por Pepper mild mottle virus (PMMoV; gênero Tobamovirus) em espécies de Capsicum tem-se tornado cada vez mais importante, devido à sua facilidade de transmissão por contato e por instrumentos agrícolas contaminados e ao aumento do cultivo de pimentões e pimentas em condições protegidas no DF. Entretanto, o estudo sobre este vírus é bastante carente no Brasil. Acredita-se que a importância deste vírus é mascarada pela ocorrência de outros vírus causadores de fortes sintomas como o Pepper yellow mosaic virus e Groundnut ringspot virus. Portanto, a real incidência deste vírus nas lavouras de pimentas do DF não é conhecida. O projeto proposto tem como objetivo caracterizar biologicamente o isolado brasiliense do PMMoV, disponibilizar uma ferramenta de detecção simples e de baixo custo com a produção de anticorpo policlonal, realizar um levantamento da ocorrência de PMMoV no DF, elucidar a seqüencia genômica completa, construir um clone infeccioso do vírus e estudar suas propriedades patogênicas em relação aos genes de resistência a tobamovírus (de L1 a L4) em Capsicum spp. Com a disponibilização do anti-soro será possível realizar uma avaliação da importância e dispersão de PMMoV no DF. Devido aos riscos de transmissão por sementes, o uso de anti-soro poderá ser de grande utilidade para monitorar a qualidade das sementes comerciais e daquelas produzidas pelos próprios produtores. Isso resultará na oferta de sementes de alta qualidade e diminuição dos riscos de perdas aos produtores. A determinação do tipo de resposta dos materiais
  Período: 2008 - 2010 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: DESENVOLVIMENTO
• Estudo das plantas daninhas como fonte de begomovírus no campo para tomateiro
  As espécies de begomovírus relatadas no Brasil são únicas e sem relatos em qualquer outro país. Acredita-se que estes vírus evoluíram de espécies presentes em outras plantas (silvestres ou daninhas) que se adaptaram para o tomateiro. A identificação da espécie é complexa e atualmente só pode ser realizada pela análise do genoma viral (sequenciamento). Trabalhos de ocorrência e distribuição de begomovírus em várias regiões do Brasil estão sendo realizados e a diversidade pode ser maior do que a atualmente conhecida. Uma das principais recomendações no manejo de uma doença, quando o controle do vetor é difícil, é a eliminação da fonte de inoculo. É comum depararmos com uma lavoura de tomate totalmente isolada de outra, porém com alta taxa de infecção por begomovírus. Grandes quantidades de plantas daninhas, muitas vezes invasoras, são observadas também apresentando sintomas de mosaico amarelo, o que lembra uma infecção por begomovírus. Este projeto propõe o estudo de plantas daninhas associadas ao tomateiro para se conhecer melhor as possíveis fontes de inoculo de begomovírus no campo.
  Período: 2006 - 2008 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Morte Súbita dos Citros: etiologia, epidemiologia e controle
  O estudo global da morte súbita dos citros, inclusive estudo molecular dos vírus (Citrus tristeza virus e Citrus sudden death-associated virus), epidemiologia e melhoramento.
  Período: 2003 - 2008 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Construção de cDNA infeccioso de Citrus sudden death-associated virus
  A morte súbita dos citros (MSC) é uma doença nova e extremamente destrutiva, cuja etiologia bem como seus possíveis vetores e controle ainda não foram esclarecidos. O nome atribuído a esta doença foi originado devido à rápida velocidade em que as plantas afetadas morrem (Informativo Centro de Citricultura, 2001). A MSC foi observada pela primeira vez em 1999 na cidade de Comendador Gomes, no sul do Estado de Minas Gerais, Brasil (Gimenes-Fernandes & Bassanezi, 2001). O número de laranjeiras que apresentam os sintomas de MSC aumentou rapidamente na região em que a doença foi detectada inicialmente: de 500 plantas em 1999 (Fundecitrus, 2002) para mais de 4.000.000 em dezembro de 2005, nos estados de São Paulo e Minas Gerais (Fundecitrus, comunicação pessoal). Até o momento, os Postulados de Koch (modificado para a virologia vegetal) não foram concluídos para a MSC, visto que o isolamento dos patógenos candidatos desta doença, CTV e CSDaV, é dificultado pelo fato de que estes vírus não são transmitidos por inoculação mecânica e por não haver plantas indicadoras apropriadas. Entretanto, enquanto isso não ocorrer, a sua etiologia permanecerá sujeita a dúvidas e várias hipóteses. A tentativa de isolamento do CTV por vetor afídeo (Toxoptera citricida) está em andamento pela equipe de Fundecitrus e ESALQ. Entretanto, a maneira de transmissão e a identificação do vetor do CSDaV ainda não foram elucidadas, o que dificulta a adoção da mesma estratégia de isolamento do vírus como CTV. Este projeto propõe o teste da hipótese de que CSDaV seja o verdadeiro patógeno causador da MSC e para tanto objetiva a construção do clone infeccioso do CSDaV, sua inoculação em plantas de citros e a recuperação do vírus completo, resultando no isolamento do vírus. Uma vez constatado o isolamento do vírus, testes virológicos, visando a realização dos "Postulados de Koch", adaptado para a virologia, serão executados para finalmente se confirmar a etiologia da MSC.
  Período: 2006 - 2008 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Caracterização e desenvolvimento de sistema de detecção de flexivírus isolado de meloeiro com sintoma de
  A produção de melão (Cucumis melo) nos estados do Rio Grande do Norte e do Ceará tornou-se cada vez mais importante com o aumento da exportação aos mercados europeus. Entretanto, esta produção vem sendo seriamente afetada por uma doença denominada como "O amarelão do meloeiro". Suspeita-se que a doença causa uma grande redução no brix nos frutos, o que inviabiliza a exportação dos frutos afetados. A etiologia da doença ainda não foi totalmente determinada, entretanto estudos revelam que o agente causal pode ser transmitido por mosca-branca (Magno et al., 2002; Santos et al., 2002; Nagata et al., 2003). Estudos epidemiológicos e de transmissão por mosca-branca sugerem que o agente causal da doença seja um vírus. Até o momento, dois tipos de vírus são considerados como candidatos do agente causal: (i) um crinivírus da família Closteroviridae (Lima et al., 2002); e (ii) um vírus semelhante a carlavírus da família Flexiviridae (Nagata et al., 2003). Nosso grupo isolou um vírus do meloeiro de folhas que exibiam um sintoma típico de amarelão do meloeiro coletado no estado de Ceará. A análise do seu genoma parcial mostrou que este vírus é uma nova espécie e está relacionado, distantemente, com o gênero Carlavirus da família Flexiviridae (um flexivírus). A posição taxonômica deste vírus ainda não está determinada, pois o genoma apresenta uma série de características que o assemelham aos carlavírus e outras que o distanciam. A seqüência do genoma completo ainda não é disponível, mas é essencial para se determinar a sua real posição taxonômica. Este projeto propõe o seqüenciamento completo do genoma do flexivírus, o desenvolvimento de um método de detecção usando RT-PCR, a produção de anticorpo específico ao vírus para ser usado em um sistema diagnóstico por ELISA e o desenvolvimento de cDNA infeccioso do vírus. O flexivírus isolado pela nossa equipe é o principal candidato e as chances deste vírus se constituir no agente causal do amarelão do meloeiro são grandes.
  Período: 2006 - 2008 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Determinação das regiões genômicas de Paraya ringspot virus - type W relacionadas com a expressão de sintomas
  Estudo molecular dos isolados virulento e atenuado do Papaya ringspot virus.
  Período: 2002 - 2005 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Expressão de genes virais usando levedura e planta para uso em diagnóstico do Dengue e do desenvolvimento de Kit de detecção rápida por imunocromatografia
  O desenvolvimento de matérias (antígenos) para montar o kit diagnóstico do Dengue utilizando sistema de levedura e planta.
  Período: 2003 - 2005 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Estudos epidemiológicos de tospovirus e desenvolvimento de estratégias de controle via plantas transgênicas utilizando genes virais e receptores de insetos envolvidos nas interações tripes/tospovirus.
  Sequenciamento de genes de tospovírus e estudo sobre a interação do vírus/vetor.
  Período: 2002 - 2004 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Estudo da diversidade de geminivírus e da interação vírus-hospedeiro e vetor
  Estudo molecular e sequenciamento de geminivírus ocorrendo no Brasil.
  Período: 2002 - 2004 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Desenvolvimento de kit de detecção de vírus de planta utilizando imunocromatografia
  Detecção rápida de detecção por imunocromatografia. O projeto inclui as caracterização do vírus (Odontglossum ringspot virus) e a produção do anticorpo do vírus.
  Período: 2002 - 2004 / Situação: CONCLUIDO / Natureza: PESQUISA
• Estudo dos potyvírus que infectam solanáceas olerícolas, determinação das suas propriedades biológicas e posição taxonômica
  A caracteristica molecular do vírus isolado de tomateiro, pimenteiro e outras solanaceas
  Período: 2001 - 2003 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA
• Coleta, levantamento e caracterização de potyvírus nas principais olerícolas da família Solanaceae
  Caracterização sorológico e molecular de Potyvírus isolados importantes em tomate e outras espécies da solanacea.
  Período: 2001 - 2003 / Situação: EM_ANDAMENTO / Natureza: PESQUISA

Áreas de Atuação

• Ciências Agrárias :: Agronomia :: Virologia Vegetal :: Caracterização do Vírus
• Ciências Agrárias :: Agronomia :: Virologia Vegetal :: Interação Vírus Vetor
• Ciências Biológicas :: Biologia Geral :: Biologia Molecular :: Biotecnologia
• Ciências Biológicas :: Biologia Geral :: Biologia Molecular :: Expressão de proteína recombinante
• Ciências Biológicas :: Microbiologia :: Microbiologia Aplicada :: Microbiologia Médica

Idiomas

• Inglês: Lê: BEM, Fala: BEM, Escreve: BEM, Compreende: BEM
• Japonês: Lê: BEM, Fala: BEM, Escreve: BEM, Compreende: BEM
• Português: Lê: BEM, Fala: BEM, Escreve: BEM, Compreende: BEM

Banca Julgadora

Eventos

Orientação

Prêmios

Produção Bibliográfica

Produção Técnica